产品介绍
ABP One Step Cloning Kit是一种简单、快速并且高效的DNA重组无缝克隆试剂盒，可以实现一至四个片段同源重组。该方法首先将载体进行线性化，在插入片段正/反向PCR引物5’端引入线性化载体的末端序列，使得PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化载体两末端一致的序列 (15 – 20 bp)。这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化载体按一定比例混合后，在重组酶的催化下，50℃反应 5 – 15 min 即可进行转化，完成定向克隆。该试剂盒独特的非连接酶依赖体系，极大地降低了载体自连背景，且无需考虑插入片段自身携带的酶切位点。高度优化的5× Clone Master Mix体系，可显著提高克隆的重组效率与对杂质的耐受度，使得线性化载体与插入片段不进行纯化直接用于重组克隆成为可能，极大的简化了实验步骤。
应用
- 无缝克隆
- 快速克隆
- 高通量克隆
- DNA定点突变
实验流程
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