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2× High-Fidelity PCR Master Mix

产品介绍

本产品包含High-Fidelity DNA Polymerase, dNTP以及优化的反应缓冲液,浓度为2×,扩增能力强,扩增速度快,具有高保真性(保真性是Taq DNA Polymerase的64倍),高特异性。PCR扩增时,只需加入引物、模板和水,使Master Mix浓度为1× 时即可进行反应。使用本产品可简化操作步骤,节约操作时间,避免因多步操作带来的污染。本品提供的2× High-Fidelity PCR Master Mix含有溴酚蓝,扩增产物可直接电泳。

产品特点

◆ 高保真
◆ 高特异性
◆ 适用于长片段PCR

应用

  • 高保真PCR扩增
  • 基因定点突变
  • 基因克隆
  • 长片段扩增或者复杂模板扩增
  • 高通量PCR

实验操作程序:

1. 按下列组份配制PCR反应液。

成分 50 µl反应体系 终浓度
H2O 补至50 µl  
2× FastTaq PCR Master Mix 25 µl
10 µM 正向引物 1 µl 200 nM
10 µM 反向引物 1 µl 200 nM
模板DNA 可变 as required*

*50 µl反应体系的DNA模板用量建议如下:

DNA 用量
人基因组DNA 5 ng – 200 ng ( < 200ng)
大肠杆菌基因组DNA 100 pg – 100 ng
λDNA 10 pg – 10 ng
质粒或病毒DNA 10 pg – 10 ng

2. PCR反应条件设置:


* 扩增片段长度< 10 kb时,延伸时间设为15 – 30 sec/kb;
  扩增片段长度> 10 kb时,延伸时间设为30 – 60 sec/kb。

应用案例:

【以λDNA为模板扩增3、8、15、20 kb的DNA片段】

  1. 按下列组份配制PCR反应液
成分 50 µl反应体系 终浓度
H2O 22 µl  
2× FastTaq PCR Master Mix 25 µl
10 µM 正向引物 1 µl 200 nM
10 µM 反向引物 1 µl 200 nM
λDNA (10 ng/ul) 1 µl 10 ng

 2. PCR反应条件设置:


* 扩增片段长度3 kb 和 8 kb时,延伸时间设为30 sec/kb;
  扩增片段长度15kb 和 20 kb时,延伸时间设为60 sec/kb。

3. PCR扩增结果:


2× High-Fidelity PCR Master Mix 扩增效果

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购买 货号 产品名称 产品描述 规格 价格(¥)
D005-1 2× High-Fidelity PCR Master Mix 高保真PCR 1 mL 300
D005-2 2× High-Fidelity PCR Master Mix 高保真PCR 5 mL 800
 

资料下载

Protocol (PDF): D005